Serolojik testler: tipleri, kullanım

Hemen hemen tüm bulaşıcı hastalıkların laboratuar teşhisi patojen antijen tarafından üretilen hastanın antikorlar, serolojik yöntemlerde kan saptanmasına dayanır. Yirminci yüzyılın - Onlar on dokuzuncu tıbbi uygulamaya girdi.

Bilimin gelişmesi mikroplar ve bunların toksinleri kimyasal formüllerin antijenik yapısını tanımlamak için yardımcı oldu. Terapötik aynı zamanda teşhis sadece serum oluşturmak mümkündür. Onlar zayıflatılmış patojenler laboratuar hayvanları uygulanması suretiyle elde edilir. serolojik testler kullanılarak bakteri ya da bunların toksinlerinin belirlenmesi için kullanılan ürünler hazırlanmıştır kan tavşan ya da fareler ıslatma birkaç gün sonra.

Bu reaksiyonun dışa yönelik bir formülasyon koşullarına ve hastanın kanında antijenlerin durumuna bağlıdır. Mikroplar çözünmeyen parçacıklar, bunlar, lize hareketsiz ya da serum içinde bağlanmış, yerleşirler. antijenler çözünür ise, nötralizasyon veya çökelme olgusu görülür.

aglutinasyon (PA)

Serolojik aglutinasyon testi son derece özeldir. Gerçekleştirilmesi kolay ve hızlı bir şekilde hasta serumunda antijenlerinin varlığını tespit etmek oldukça açıktır. Bu Vidal reaksiyon ve Weigl (tifo ve paratifo teşhisini) ayarlanması için kullanılır (tifüs).

Bu insan antikorları (ya da aglütinin) ve mikrobiyal hücreler (agglyutenogenami) arasında spesifik bir etkileşime dayalıdır. etkileşimini takiben çökeltilmesi parçacıkları oluşturulur. Bu olumlu bir işarettir. reaksiyon ayarlanması için canlı ya da ölü mikrobiyal maddeler, mantar, protozoa, kullanılabilir kan hücreleri ve somatik hücrelerin.

Kimyasal reaksiyon iki aşamaya ayrılır:

1. antijenler ile spesifik antikorlar, bileşik (AT) (Ag).
2. Spesifik olmayan - holdinglerin birikimi AG-AT agglutinate'e oluşumunu yani.

Reaksiyon dolaylı aglutinasyon (TPHA)

Bu reaksiyon, bir öncekinden daha fazla duyarlıdır. Bu bakteriler, hücre-içi parazitlerin, protozoa neden olduğu hastalıkların teşhis edilmesi için kullanılır. Bu yüzden antikorlar, hatta çok düşük konsantrasyonlarda algılayabilir özgüdür.

Arıtılmış koyun kırmızı kan hücrelerini ve antikorları veya antijenleri ile önceden muamele insan kırmızı kan hücrelerini kullanarak formülasyonu için (bulmak istediğini laboratuar bağlıdır). Bazı durumlarda, insan kırmızı kan hücreleri immünoglobünlerle tedavi. çökeltme bunların tüpün altındaki oluştu, eritrositlerin serolojik tepkisi geçerli kabul edilir. hücreler bir ters şemsiye şeklinde düzenlenmiş olduğunda pozitif reaksiyon biz tüm alt işgal söyleyebiliriz. Kırmızı kan hücreleri, alt merkezinde bir sütun ya da düğme şeklinde yerleşmek negatif reaksiyon puanlanmıştır.

Çökeltme reaksiyonu (RP)

Bu tip serolojik reaksiyonlar son derece küçük parçacıklar antijenleri tespit etmek vermektedir. Bu şekilde, örneğin, proteinler (veya bunların kısımları), lipitler veya karbonhidrat, bakteriler ve bunların toksin parçası proteinlerin bileşikler olabilir.

Reaksiyon için Sera hayvanlar, tipik olarak tavşan suni aşılama ile elde edilir. Bu yöntemde, kesinlikle herhangi presipite serumu alabilirsiniz. aglütinasyon eylem serolojik çökeltme benzer bir mekanizma Evreleme. antijenlerin serum bağlama içerilen antikorlar koloidal çözelti tüpün tabanında ya da alt-tabaka (jel) üzerinde biriken büyük protein molekülleri oluşturmak için. Bu yöntem, son derece spesifik olacaktır ve madde miktarlarını bile tespit iz olabilir olarak kabul edilir.

veba, tularemi, teşhis için kullanılır şarbon, menenjit ve diğer hastalıkları. Ayrıca adli muayene dahil.

Jel çökelme testi

Serolojik test sıvı bir ortam içinde, fakat agaroz jeli içinde sadece gerçekleştirilebilir. Bu yaygın çöktürme yöntemi olarak adlandırılır. Bununla beraber, kompleks antijenik karışımların bileşimini incelemek. Bu yöntem, antikor antijenlerin kemotaksisi ve bunun tam tersi dayanır. Farklı hızlarda ve toplantıda birbirine doğru hareket jel çökeltme çizgileri oluşturmak için. Her satır - K-AT biri kümesi.

Nötralizasyon eksotoksin antitoksini (RN)

Antitoksik serum mikroorganizmalar üretmek eksotoksini nötralize edebilir. Bu veri ve serolojik testlere göre. Mikrobiyoloji serumlar, toksinler ve toksoidler titrasyonu, hem de bunların terapötik etkinlik için bu yöntemi kullanır. toksin nötralizasyon gücü geleneksel birimleri tarafından belirlenir - AE.

Ayrıca, bu reaksiyon nedeniyle eksotoksini ait türler veya türlerini belirler. Bu tetanos, difteri, botulizm teşhisinde kullanılır. Çalışma "Cam üzerinde" gerçekleştirilir ve bir jel içinde olabilir.

liziz reaksiyonu (RL)

hastanın vücut girer bağışıklık serumu, ayrı ana işlevinden sahiptir , pasif bağışıklık bile ve litik özellikleri. Mikrobiyal ajanlar, hastanın vücut giren hücresel ve dış elemanlar virüsü çözündürebilen. Serum izole bactericidin, sitolizinlerin, spirohetoliziny, hemolizinler ve diğer yer antikorların özelliğine bağlı olarak değişir.

Bu belirli antikorlar "tamamlayıcısı" olarak adlandırılır. Bu bir kompleks protein yapısına sahip ve sıcaklık artışı, sarsılmış, asitler ve doğrudan güneş ışığına çok hassastır, hemen hemen tüm vücut sıvılarında bulunur. Ama kurutulmuş halde altı aya kadar onların litik özelliklerini korumak edebiliyor.

Bu tip serolojik testlerin bazı türü vardır:

- bacteriolysis;

- hemoliz.

Bacteriolysis canlı mikroplar ile hastanın kan serumu ve spesifik bağışıklık serumu kullanılarak gerçekleştirilir. Eğer, daha sonra araştırmacı bakterilerin lizizi görür ve pozitif tamamlayıcı yeterli sayıda kanda mevcut olan gibi bir cevap olarak mütalaa edilecektir.

ikinci kan serolojik tepki, eritrosit süspansiyonu sadece belirli bir iltifat mevcudiyetinde aktive edilen hasta serum içeren hemolizinler tedavi olmasıdır. bir, kırmızı kan hücrelerinin çözünmesini izlerken de laboratuar varsa. Bu reaksiyon, yaygın olarak kompleman titresini belirlemek için modern tıpta kullanılmaktadır (yani kırmızı kan hücrelerinin lizizine tahrik en küçük miktarda) kan serumunda ve tamamlayıcı bağlama deneyinde üretimi için kullanılabilir. Bu frengi için serolojik tepkiyi yürütülen bu şekilde oldu - Wasserman.

Kompleman sabitlenmesinin (RSK)

Bu reaksiyon, enfeksiyon yapıcı bir maddenin hastaya, serum antikorları tespit etmek için hem de antijenik yapısının yaratıcısı tanımlamak için kullanılır.

Bu noktaya kadar basit bir serolojik testler nitelendirdiler. bir antikor, bir antijen ve tamamlayıcı: bu iki değil, ancak üç elemanları etkileşim yana RAC, zor reaksiyonu olarak. Özü, antikor ve antijen arasındaki etkileşim, sadece oluşan kompleksi K-AT yüzeyine adsorbe edilir proteinlerin iltifat mevcudiyetinde meydana gelmesi olgusuna dayalıdır.

Kendilerini reaksiyon kalitesini gösterir önemli değişikliklere tabi tamamlayıcı ilave edildikten sonra antijenleri. Bu parçalama, hemoliz, hareketsizlik, bakterisidal veya bakteriyostatik etkisi olabilir.

Reaksiyon kendisi iki aşamadan oluşur:

1. gözle araştırmacı değil, antikor-antijen oluşumu.
2. tamamlayıcı etkisi altında antijen değiştirilmesi. Bu aşama genellikle çıplak gözle izlenebilir. Görsel yanıt görünür değilse, o zaman bir değişiklik tespit sağlayan ek gösterge sistemi kullanır.

gösterge sistemi

Bu reaksiyon, kompleman birleşmesine dayanır. Test tüpleri saat ayarlandıktan sonra RSK saflaştırılmış koyun eritrositleri ve tamamlayıcı içermeyen serum hemolitik ilave edildi. Tüp bağlanmamış tamamlayıcı bırakıldı, bu koyun kan hücreleri ve hemolizin arasında oluşan kompleks N-AT katılması, ve çözünmesine neden olur. Bu DGC negatif olduğu anlamına gelecektir. Kırmızı kan hücreleri, aynı kalmıştır, daha sonra, uygun şekilde, reaksiyon, pozitiftir.

Hemaglutinasyon (RHA)

İki temelde farklı hemaglütinasyon vardır. Bunlardan biri - serolojik, kan gruplarının belirlenmesi için kullanılır. Bu durumda antikorlar ile etkileşim eritrosit.

Kırmızı kan hücreleri, virüsler tarafından üretilen hemaglutinin ile reaksiyona beri ikinci reaksiyon, serolojik ile ilgili değildir. her ikaz sadece belirli eritrositler (tavuk, koyun, maymun) üzerinde etkili olduğundan, bu reaksiyon dar spesifik varsayabiliriz.

Açık pozitif ya da negatif tepki, bu borunun alt kan hücrelerinin konumu için mümkündür. onlar ters şemsiye andıran anlamaya, sonra istenen virüs hastanın kanında mevcuttur. Tüm kırmızı kan hücreleri bir sikke sütunları gibi oluşmuş eğer, hiçbir bilinmeyen patojenler vardır.

Hemagglutinasyonun önlenmesi reaksiyonu (HAI)

Virüsün bir şekilde, tip veya hastanın kan serumunda spesifik antikorların varlığını belirlemek için olanak sağlar Bu son derece spesifik reaksiyon.

Özü, test malzemesi ihtiva eden tüpe ilave antikorlar, böylece hemaglutinasyon durdurma eritrosit üzerindeki antijenlere birikmesini önler gerçeğinde yatar. Bu, belirli bir arzu edilen virüs kanında spesifik antijenlerin niteliksel bir göstergesidir.

Reaksiyon immünfloresans (RIF)

Reaksiyon tedavi flyuorohromnymi boyalar sonra AT-AH floresan mikroskobu ile kompleksler tespit etmek yeteneğine dayanır. Bu yöntem, saf kültür izolasyonunu gerektirmez, kullanımı basit ve az zaman alır. Bulaşıcı hastalıkların hızlı tanı için vazgeçilmezdir.

Doğrudan ve dolaylı: Uygulamada, bu serolojik testler iki kategoriye ayrılır.

Doğrudan RIF önce floresan serumu işlenmiş antijen üretti. Ve dolaylı ilaç ilk olarak geleneksel DIAGNOSTICUM kompleks K-AT proteinlerine özel olan ve mikrobiyal hücreler, mikroskopi ile görünür hale floresan peynir altı suyu, uygulanan tekrar daha sonra arzu edilen antijene karşı antikorlar ihtiva eden ile muamele edilmesidir.